Aspergillus wentii İnülinazı'nın gen ekspresyon seviyelerine üretim şartlarının etkisi

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Trakya Üniversitesi, FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ, -, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2014

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: AYTEN SARI

Danışman: FİLİZ SANAL

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışmada, Aspergillus wentii'den inülinaz enziminin üretilmesi, optimum üretim şartlarının belirlenmesi ve bu şartların enzim üretimini nasıl etkilediğinin tespiti ayrıca elde edilen biyokimyasal sonuçların moleküler çalışmalardan elde edilen verilerle karşılaştırılması amaçlanmıştır. A.wentii'den inülinaz enziminin optimumüretim şartlarının inülinaz aktivitesi üzerine etkileri incelendiğinde, inülinaz aktivitesinin maximum olduğu şartlar, üretim süresi 3 gün, üretim sıcaklığı 30 oC, üretim ortamı başlangıç pH'sı 6.0 ve yer elması konsantrasyonu %3 olarak belirlenmiştir. Üretim ortamına eklenen C ve N kaynaklarının inülinaz aktivitesine etkisi araştırıldığında, en yüksek aktivite %1 Maltoz içeren ortamda görülmüştür. %1 (NH4)2HPO4 içeren ortamın ise, çalışılan diğer azot kaynaklarına göre daha iyi bir üretim ortamı olduğu tespit edilmiştir. Enzimin pH ve termal kararlılıkları incelendiğinde ise enzimin pH 5-6 aralığında kararlı olduğu ve aktivitesini 50 oC'de 30 dk.süre ile koruduğu gözlenmiştir. A.wentii'nin üretim şartlarının, inulinaz enzimi gen ekspresyon seviyelerine etkileri aktine rölatif gen ekspresyonu üzerinden incelendiğinde üretimin 1.gün'de, 35 oC'de, pH 6.0'da, %2 yer elması konsantrasyonunda, karbon kaynağı olarak %1 selüloz ve azot kaynağı olarak %1 NH4H2PO4 kullanıldığında gen ekspresyon seviyeleri en yüksek seviyelerde tespit edilmiştir.A.wentii inulinaz'ının hidroliz ürünlerinin incelemesi ince tabaka kromotografi (TLC) yöntemi ile gerçekleştirilmiş ve A.wenti inulinaz'ının ekzoinulinaz olduğu belirlenmiştir.