İnsan glioblastoma U87 hücre hattında piceatannol ve EGFR inhibitörü erlotinib kombinasyonunun hücre proliferasyonu, hücre döngüsü ve apoptoz üzerine etkisi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Trakya Üniversitesi, FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ, BİYOTEKNOLOJİ VE GENETİK ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2021
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: TOURKIAN CHASAN
Danışman: OĞUZHAN DOĞANLAR
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Glioblastoma multiforme (GBM), evre IV astrositoma olarak bilinen en yaygın ve agresif primer beyin tümörlerinden biridir. Cerrahi, radyoterapi, kemoterapi ve kombine tedaviyi içeren multimodalite tedaviye rağmen prognoz hala kötüdür ve hastalar genellikle tanıdan 6-14 ay sonra ölürler. Epidermal büyüme faktörü reseptörü (EGFR), GBM'nin % 60'ında aşırı eksprese edilen bir reseptör tirozindir. EGFR aktivasyonu, RAS/RAF/MAPK, PI3K/AKT/mTOR ve JAK/STAT dahil olmak üzere çoklu aşağı akış sinyal yolaklarının otofosforilasyonuna yol açar. Erlotinib, güçlü bir geri dönüşümlü EGFR tirozin kinaz inhibitörüdür. Doğal bir polifenolik stilben bileşiği olan Piceatannol ise antikanser özelliklere sahiptir. Bu çalışmanın amacı, Erlotinib ve Piceatannol kombinasyonunun EGFR aktivasyonu ile tetiklenen sinyal yolakları üzerindeki etkilerini açıklamak ve GBM tedavisindeki rolünü araştırmaktır. Güçlü sinerjistik etkiyi ortaya çıkaran en etkili dozlar MTT testi ile belirlenmiştir. Her ajanın tekli ve kombinasyon uygulamalarının sinyal yolakları üzerindeki etkileri qRT-PCR ve western blot analizi ile araştırılmıştır. Kombinasyonun apoptoz yolağı üzerindeki etkisini incelemek için hücre döngüsü testi, Annexin V/PI boyama ve floresan moleküler görüntüleme yapılmıştır. Erlotinib ve Piceatannol uygulamaları ile hücre canlılığı U87-MG hücrelerinde doza ve zamana bağlı olarak önemli düzeyde azalmıştır. U87-MG hücrelerinde Bliss skoru 25 olan 10 μΜ Erlotinib ve 20 μΜ Piceatannol kombinasyonu, hücre proliferasyonunu sinerjik olarak inhibe etmiştir. Kombinasyon uygulamasında EGFR gen ekspresyonu, EGFR, Ras ve Raf protein ekspresyonları kontrole göre önemli ölçüde azalmıştır. Erlotinib ve Piceatannol kombinasyonu, insan glioblastoma hücrelerinde JAK2/STAT3 yolağını da baskılamıştır. Ayrıca, Erlotinib ve Piceatannol, G1/S kontrol noktası hücre döngüsü tutuklanmasına yol açmış ve kombine uygulaması, iki ajandan herhangi birinin tek başına uygulanmasından daha etkili bir şekilde intrinsik apoptozu indüklemiştir. Bu sonuçlar, Erlotinib ve Piceatannol kombinasyon terapi modelinin, GBM tedavisinin etkinliğini arttırmada umut verici, hedeflenmiş güçlü bir strateji olarak kabul edilebileceğini düşündürmektedir.