CAPE ile NF-κB yolağı baskılanan insan hepatoma hücre serisi Hep3B'de, kersetinin apoptotik etkisi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Trakya Üniversitesi, SAĞLIK BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ, ., Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2017
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: MAİDE KAŞİT
Danışman: OĞUZHAN DOĞANLAR
Özet:Hepatosellüler karsinom (HCC) dünyada görülme sıklığı açısında altıncı sırada yer alan bir karaciğer kanseri türüdür. Hepatit B virüsü (HBV) ve hepatit C virüsü (HCV) enfeksiyonlarına, yüksek alkol tüketimine ve çevresel risk faktörleri gibi etiyolojik faktörlere bağlı olarak gelişir ve kötü prognozu nedeniyle üçüncü en ölümcül kanserdir. Son zamanlarda polifenoller özellikle antikanser özellikler taşıması yönüyle ilgi çekici bir hale gelmişir. Bal arılarının ürettiği propolisten elde edilen kafeik asit fenetil ester (CAPE), kemoterapi diyetlerinde etkili olan ve katekol halka içerisinde hidroksil grupları içeren bir polifenoldür. NF-κB, apoptoz ve hücre ölümü gibi hücre sinyal yolaklarında önemli bir rol oynar. Çeşitli gıda ürünlerinde ve bitkilerde bulunan kersetin hücreleri reaktif oksijen türlerinin neden olduğu oksidatif strese karşı koruması ve antioksidan özellikleriyle bilinmektedir. Hidroksil gruplarına sahip olan kersetin ayrıca geri dönüşümsüz DNA hasarının ve mitokondriyal apoptozun aktivasyonu, glikolizin ve hücre döngüsünün engellenmesi gibi çeşitli mekanizmalar yoluyla kanser hücrelerinin çoğalmasını önlemektedir. Tez kapsamında hepatosellüler karsinom Hep3B hücre serisine CAPE ve kersetinin tek ve kombine olarak uygulanması ile antikanser özelliklerinin hücre çoğalmasını önleyici etkisi ve genetik mekanizmaları analiz edildi. CAPE ve kersetinin tekli ve kombine uygulamalarından sonra, hücre canlılığı MTT testi kullanılarak, nekroz-apoptoz ise TALİ sitometre cihazı ile hücre membranı anneksin-V/propidyum-iyodür ile boyanarak incelendi. NF-κB ve mitokondriyal apoptoz yolaklarına ait gen ekspresyon çalışmaları RT-qPCR ile gerçekleştirildi. Tez çalışmamız Hep3B'de hem CAPE hem de kersetinin, doza ve zamana bağlı olarak hücre canlılığını dramatik olarak azalttığını, CASP3 ve CASP8 aracılığı ile kaspaz bağımlı apoptozu indüklediğini gösterdi. CAPE uygulanan deneysel gruplarda NF-κB inhibisyonu gözlendi. Kombine uygulama, tüm deney gruplarında hücre ölümü ve apoptoz oranını azalttı. CAPE IC50 ve CAPE 2IC50 uygulanan gruplarda kersetinin IC50 dozu sırasıyla 88 ve 34 kat arttı. Çalışma sonucunda CAPE ve kersetin kombinasyonunun antagonistik etkiye neden olmasına rağmen, tek başına uygulanan CAPE ve kersetinin antiproliferatif etki ve spesifik apoptotik potansiyele sahip birer potansiyel antikanser ajan oldukları belirtildi. Anahtar Kelimeler: kanser, hepatosellüler karsinom, kersetin, kafeik asit fenetil ester, NF-kappa B