Amaç: Bu çalışmanın amacı galangin (Gal) daktinomisin kaynaklı hepatotoksisite üzerindeki etkilerini in vitro olarak incelemektir. Gereç ve Yöntem: AML-12 hücre hattı, kontrol, Gal, daktinomisin ve Gal+daktinomisin olmak üzere 4 gruba ayrıldı. IC50 dozu tiazolil mavi tetrazolyum bromid yöntemi ile belirlendi. Glutatyon (GSH), süperoksid dismutaz (SOD), katalaz, kaspaz-3 (Cas-3), Cas-9, apoptotik proteaz aktive edici faktör 1 (Apaf-1), Bcl-2, Bax, p53, apoptoz bağlayıcı protein inhibitörü (smac/DIABLO), topoizomeraz (Top) I ve Top II gen ekspresyonları Kantitatif gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu analizi ile incelendi. Bulgular: Daktinomisin, oksidatif etkilere yanıt olarak SOD, katalaz ve GSH ekspresyonunu artırdı. Gal+daktinomisin grubunda Gal uygulaması, antiapoptotik etkilerle Apaf-1 ekspresyonunu azaltırken, Bcl-2 ekspresyonunu artırdı. Daktinomisin grubunda DNA hasarına karşı savunma mekanizması nedeniyle p53 seviyeleri arttı. Gal, hasarlı yapıları kaldırmak amacıyla smac/DIABLO ekspresyonunu artırdı. Gruplardaki Bcl-2 ve smac/ DIABLO ekspresyon seviyeleri ters orantılı idi. Gal+daktinomisin grubunda Top II ekspresyon düzeyi, daktinomisin grubuna göre daha düşük bulundu. Bu durum, çift sarmal DNA hasarının Gal tarafından azaltıldığını göstermektedir.
Aim: The purpose of this study was to evaluate the effects of galangin (Gal) on dactinomycin induced hepatotoxicity in vitro. Materials and Methods: AML-12 cell line was divided into 4 groups as the control, Gal, dactinomycin, and Gal+dactinomycin groups. IC50 dose was determined by the thiazolyl blue tetrazolium bromide test. Gene expressions of glutathione (GSH), superoxide dismutase (SOD), catalase, caspase 3 (Cas-3), Cas-9, apoptotic protease activating factor-1 (Apaf-1), B cell CLL/lymphoma-2 (Bcl-2), Bcl-2 associated X protein (Bax), tumor protein p53 (p53), second mitochondria-derived activator of caspase/direct inhibitor of apoptosis-binding protein (smac/DIABLO), topoisomerase (Top) I, and Top II were determined with quantitative real-time polymerase chain reaction analysis. Results: Dactinomycin elevated the expression of SOD, catalase, and GSH in response to oxidative effects. In the Gal+dactinomycin group, Gal administration reduced Apaf-1 expression and increased Bcl-2 expression with antiapoptotic effects. In the dactinomycin group, p53 levels increased due to the defense mechanism against DNA damage. Gal increased smac/DIABLO expression to remove damaged structures. Bcl-2 and smac/DIABLO expression levels in the groups were inversely proportional. In the Gal+dactinomycin group, Top II expression level was lower than in the dactinomycin group. This result indicated that double strand of DNA damage was diminished by Gal. Conclusion: Gal protected against the hepatotoxicity due to dactinomycin with antioxidant and antiapoptotic effects. Further experimental studies are needed to establish the use of Gal in liver damage.
