Epilepsi Hastalarında IL-18 (-607 C/A), IL-18 (-137 G/C) Gen Varyasyonları ve IL-18 Serum Ekspresyon Düzeyleri Arasındaki İlişkinin Belirlenmesi

Epilepsi nöronların psişik ve somatik fonksiyonlarındaki bilinç kaybı olaylarını ve beyin fonksiyonlarındaki geçici, tekrarlayan bozuklukları içeren nörolojik bir hastalıktır. The relationship between epilepsy and the immune system is quite complex. Epilepsi hastalarında sitokin ekspresyonunda ve immün hücrelerde gözlenen anormallikler, immün sistem reaksiyonlarının epileptik epileptogenezde önemli bir rol oynayabileceğini düşündürmektedir. İnterlökin-1 (IL-1) ailesiyle ilişkili bir inflamatuar sitokin olarak İnterlökin-18 (IL-18) merkezi sinir sisteminde sentezlenebilen ve reseptörleri nöronlarda eksprese edilebilen önemli mediyatörlerdir. IL-18’in potansiyel bir mediyatör olarak epilepsi patogenezinde inflamasyon rolünü desteklediği düşünülmektedir. Ayrıca IL-18, nöbet kaynaklı beyin hasarı sonrasında kan beyin bariyeri permeabilitesinde artışa yol açmakta ve epileptogenezde önemli bir rol oynamaktadır. IL-18 epileptogenezde zararlı etkiler ve protektif etkiler gösterebilen bir mediyatör olarak araştırılması gereken önemli bir sitokin olarak kabul edilmektedir. IL-18 genindeki bu genetik varyasyonlar sonucunda inflamatuar sitokin ekspresyonunun değişebileceği ve hastalık patogenezinin etkilenebileceği düşünülmektedir. Bu yüzden çalışmamızda epilepsi hastalarında IL-18 (-137 G/C), IL-18 (-607 C/A) gen varyasyonları ile IL-18 serum ekspresyon düzeyleri arasındaki ilişkinin belirlenmesi amaçlanmıştır.

Bu çalışma en az 83 hasta ve 83 kontrol olmak üzere toplam 166 kişi ile gerçekleştirilecektir. Hasta ve kontrol gruplarından etilendiamintetraasetik asit (EDTA) içeren periferik venöz kanlar toplanacaktır. Bu kanlardan total DNA izolasyonu izolasyon kiti kullanılarak gerçekleştirilecektir. DNA’lar için spektrofotometrik yöntem kullanılarak kalite ve miktar tayini yapılacaktır. IL-18 (-137 G/C) ve IL-18 (-607 C/A) gen varyasyonları genotip dağılımları polimeraz zincir reaksiyonu (PZR) yöntemi kullanılarak gerçekleştirilecektir. IL-18 (-137 G/C) ve IL-18 (-607 C/A) gen varyasyonlarının genotip dağılımları %2.5’luk agaroz jel elektroforezi ile gözlenecektir. Epilepsi tanısı alan hastalardan ve sağlıklı kontrollerden önceden rutin tetkikler için alınmış kan örneklerinden 4000xg’de 10 dk santrifüj işlemi yapıldıktan sonra bu kanlardan serum örnekleri elde edilecektir. Elde edilen serum örnekleri serum ekspresyon düzeylerinin ölçümleri gerçekleştirilinceye kadar -860C’de depolanacaktır. Serum IL-18 düzeylerinin tayini kitlerinin önerdiği protokole göre ELISA yöntemi uygulanarak gerçekleştirilecektir.

Çalışmamızdan elde edilecek sonuçların istatistiksel analizi IBM SPSS programının 20.0 versiyonu kullanılarak gerçekleştirilecektir. IL-18 (-137 G/C), IL-18 (-607 C/A) gen varyasyonları genotip dağılımları ve epilepsi hastalığı gelişimi arasındaki ilişkinin belirlenmesinde verilerin dağılım özellikleri de dikkate alınarak student-t testi, Mann Whitney U testi, Ki-kare testi ve lojistik regresyon analizlerinden uygun olanları kullanılacaktır.

 Çalışmamızda epilepsi patogenezinde önemli olabilecek serum IL-18 ekspresyon düzeylerine göre IL-18 (-137 G/C), IL-18 (-607 C/A) gen varyasyonlarının genotip dağılımları belirlenebilecek ve epilepsi gelişiminde etkili olabilecek önemli biyobelirteçlerin saptanması sağlanabilecektir. Bu çalışma sonucunda, epilepsi patogenezinde etkili olabilecek önemli biyobelirteçlerin saptanabilmesi, dolayısıyla epilepsi tedavisi için yeni terapötik stratejilerin geliştirilebilmesine yardımcı olabilecek önemli bilgilerin elde edilebilmesi amaçlanmaktadır. Çalışmamızdan elde edilecek bulguların daha sonra yapılacak çalışmalar için literatüre katkı sağlayacağı düşünülmektedir.

Anahtar Kelimeler:  Epilepsi, IL-18, genetik varyasyonlar, PZR, ELISA